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                AFLP檢測服務

                AFLP檢測服務

                AFLP是基於PCR技術擴增基因組DNA限制性片段,基因組DNA先用限制性內切酶◆切割,然後將雙鏈接頭連接▲到DNA片段的末端,接頭序列和相鄰的限制性位點序列,作為引物結合位點。限制性片段用二種酶切割產生,一種是罕見切割朋友们酶,一種是常用切割酶。它結合了RFLP和PCR技術特點,具有RFLP技術的可▓靠性和PCR技術的高效性。由於AFLP擴增可使某一品種出現■特定的DNA譜帶,而在★另一品種中可能無此譜帶產生,因此,這種也沉下心来通過引物誘導及DNA擴增後得到的DNA多態性可做為一種分ξ子標記。

                操作流程

                AFLP反應程序主要包括模板DNA制備,酶切片段擴增及凝膠電泳分析這3個◥基本步驟。各步驟具體的過还是很到位程有:
                1.首先要制備高分子量(HMW)基因組DNA,選擇6個堿基識別位點的限▂制性內切酶(通常是EcoRI或PstI或SacI)。
                2.酶切後的限制性片段在T4連接酶的作用下與特定的接頭相連□接,形成帶有接頭的特異性片段↘。
                3.DNA片段的∩預擴增。
                4.在Taq聚合酶的作用下,完成AFLP的選擇性擴动作增。
                5.帶熒光標記的PCR產物進行№測序儀上機檢測。
                6.多態性比較分析。


                AFLP結果示例


                送樣要求

                細胞(≥106)、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、基因組DNA(體積≥20μl,濃度≥ 50 ng/μl)。

                提供結果

                原始數據、引物序列、實驗報告、PDF格式毛細管電泳Ψ圖譜和EXCEL格式↓片段長度◆

                成功案例

                某單位客戶進行了微衛星的檢測後發現▼標記不足,加做了AFLP標記,利用分型圖譜最終構︻建了比較成功的遺傳連鎖圖譜。

                檢測項目

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