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                科研領域

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                mRNA/lncRNA熒光定量

                mRNA/lncRNA熒光定量

                mRNA 存在於原核生物和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器你已经把人打得血肉模糊半死不活中,攜帶遺傳信息,在蛋白質合成時充當模板的RNA。信使RNA從脫氧核糖核酸(DNA)轉錄合成的帶有遺傳信息的一類單鏈核糖核酸(RNA)。它在核糖體上作為蛋白質合成的模板,決定肽鏈的氨基酸排列順序。mRNA的表達對於生物體內的生命活動有著極為重要的作用,因此對mRNA的表達檢測是在許多研究中必要的。實時定量PCR由於其靈敏度高、方便,快速自己主动表白竟然被拒绝等特點,成為檢測mRNA表達情況的一個常用技術。

                長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一一旦到了关键时刻類長度大於200個核苷酸的非編碼RNA,其本身並不編碼蛋白或少編碼蛋白質,但能夠通過參與細胞內多種過程調控,在表觀遺傳調控、細胞周期調控和∏細胞分化調控等眾多生命活動中發揮重㊣要作用,成為繼miRNA之後的新研究熱點。

                服務項目

                mRNA
                實時定量PCR表達檢測
                lncRNA
                實時定量PCR表達檢測


                運用成熟的實時定量檢測技術,結合目標mRNA/ lncRNA的特點設計特異性引物,保證擴增的特異性和準確性,提供穩定的檢測〖結果。

                技術路線

                mRNA表達量檢測



                技術特點:

                真核生物的mRNA逆轉錄可以采取使用Oligo(dT)為引报答这段恩情物的方法,原核生物的mRNA逆轉錄可使时间过用隨機引物。在真核生物RNA質量不佳時,可同時使用Oligo(dT)和隨機引物進行反轉錄★。後根據序列特點直接≡設計相應的通用引物和特←異性TaqMan探針即可。


                真核生物mRNA反轉錄示意圖




                IncRNA表達量檢測




                技術特點:

                lncRNA與mRNA不同,可能具備polyA尾巴也可能不具有,因此在逆轉錄lncRNA的時候,統一使用隨機引物進行擴增。後根據序列特點直接設計相應的通①用引物和特異性TaqMan探針即可。除常規TaqMan探針以外,用戶還可選擇設計合◇成TaqMan-MGB探針,其探針△設計得更短,可使得探針設計的成功率大為提高。


                目的lncRNA的熔解曲線圖 (儀器為Thermo Fisher Q6)

                收樣要求

                組織
                >300mg 新鮮動植物樣本,≥100mg葉片樣本等
                細胞
                >106個懸浮/貼壁細胞
                血液
                >1ml全血/全血分離的有核細胞

                RNA

                針對mRNA:總RNA >1μg,體積>20μl,濃度> 50 ng/μl

                針對lncRNA:總RNA>4μg,體積≥20μl,濃度≥200 ng/μl

                您可以得到的數據分析

                mRNA熒光定量
                引物(或探針)及序列,擴增曲線,熔解曲線(SYBR Green方法)、數據分析結果報告。

                lncRNA熒光定量

                引物(或探針)及序列,擴增曲線,熔解曲線(SYBR Green方法)、數據分析結果報告。

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