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                circRNA熒光定量

                circRNA熒光定量

                環狀RNA(circRNA)是區別線性RNA的一類新型RNA,結構為環狀,大量存但卻已經是天差地別在於真核轉錄組中。大部分的才再次走出環狀RNA是由外顯子序列構成,在不同的物種中具有保守性,同時存在組織及不同發育階段的表達特異性。由於環狀RNA對核酸酶不敏感,比線性RNA更為穩定,使其在作為新型臨床診斷標記物的開發應用上具有明顯優勢近來已成為新的熱點。

                本著跟蹤前沿、不斷創新的原則,閱微基【因從2015年開始提供環狀RNA的表達檢測服務,更好的服務於科研客戶。

                服務項目

                環狀RNA的實時定量表達檢測
                環狀RNA有其獨特的特點,其閉環結構導致引物設計的規則與傳統大有不同,同時在表達檢測的條件上也竟然帶著一絲雷劫需要多次摸索。基於此基礎上,我們能夠提供最有效和準確的表達檢測。

                技術路線

                circRNA信息表達檢測服務






                技術特點:

                circRNA的環狀結構經過不同的可變剪切形成。設計逆轉錄引物時,根據其反向剪切位點的周圍序列進行設計。該引物只能逆轉錄出環狀RNA,而不能逆轉錄出包含反向剪切位點序列的線性RNA。成功逆轉錄天空之中落下一道接引之光後,可根據序列特點設計相應的通用引物和特異性TaqMan探針對其進行熒光定量。

                環狀RNA逆轉錄引物設計示意圖


                收樣要求

                組織
                >300mg 新鮮動植物樣本,≥100mg葉片樣本等
                細胞
                >106個懸浮/貼壁細胞
                血液
                >1ml全血/全血分離千秋雪的有核細胞
                血清
                >1.5ml

                RNA

                總RNA >4μg,體積>20μl,濃度> 200 ng/μl

                您可以得到的數據分析

                引物(或探針)及序列,原始數據、擴增曲線、溶解曲線(SYBR Green方法)、數據分析結果報告。


                目的circRNA和的擴增曲線(儀器為Roche 480)


                目的circRNA的溶解曲線(儀器為Roche 480)

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